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凱傑Ni-NTA Agarose試劑是親(qin) 合層析用基質,用於(yu) 純化帶有His標簽的重組蛋白。細胞裂解上清液上樣到純化基質上,His-tagged蛋白結合,其他蛋白則流過基質。洗滌後,His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。
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凱傑Ni-NTA Agarose試劑是親(qin) 合層析用基質,用於(yu) 純化帶有His標簽的重組蛋白。細胞裂解上清液上樣到純化基質上,His-tagged蛋白結合,其他蛋白則流過基質。洗滌後,His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。
凱傑Ni-NTA Agarose試劑的特點:
一、一步純化就可從(cong) 細胞裂解液中得到純度大於(yu) 95%的蛋白
二、高親(qin) 和力和高結合能力
三、可以選擇在天然或變性條件下純化蛋白
四、預先加載的即用型基質適合任何規模的蛋白純化
五、提供自動純化和檢測的方法
QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基於(yu) 獲得Ni-NTA(氨基三乙酸鎳)樹脂。該技術可在天然或變性條件下,從(cong) 所有表達體(ti) 係中一步純化幾乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四個(ge) 鎳離子螯合位點,與(yu) 鎳的結合能力比其他僅(jin) 有三個(ge) 金屬螯合位點的金屬螯合純化方法的結合能力強。多出的一個(ge) 螯合位點可防止鎳離子脫落,因此具有更強的結合能力,蛋白純度比金屬螯合純化方法的蛋白純度高。QIAexpress技術可用於(yu) 從(cong) 杆狀病毒、哺乳動物細胞、酵母和細菌等各種表達體(ti) 係中純化His-tagged蛋白。
His-tagged蛋白的純化包括四個(ge) 步驟:裂解、結合、洗滌和洗脫。使用QIAexpress 技術純化重組蛋白無需依賴於(yu) 蛋白的三維結構或6xHis標簽。因此可實現在天然或變性條件下,從(cong) 稀釋溶液或細胞裂解液中一步純化蛋白。可使用強變性劑和洗滌劑高效溶解和純化受體(ti) 、膜蛋白和形成包涵體(ti) 的蛋白。洗滌緩衝(chong) 液中可包含有能高效去除非特異性結合產(chan) 物的試劑。在溫和條件下加入100–250 mM咪唑作為(wei) 競爭(zheng) 性洗脫試劑或降低pH值,可洗脫得到純化蛋白。
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